随着我国宠物行业的快速发展，越来越多的抗生素被用于宠物疾病的预防和治疗。在抗生素的选择压力下，细菌耐药性也越来越严重，耐药性的产生和加剧必然为细菌性疾病的治疗带来困难。由于宠物寿命长，与主人接触多，促进了微生物群落在二者之间的相互转移，通过皮肤接触或由携带微生物的唾液、粪便直接传播，或通过家庭环境间接传播[1]。进入新的宿主后，耐药菌能够在短时间内定植、感染并持续存在于新环境中，将自身携带的耐药基因传播给宿主菌群，共生或导致机体发病，同时又能够接受宿主菌群的耐药基因[2]。因此，宠物的抗生素耐药性不仅是兽医上的一个重要问题，同时也对公共卫生产生威胁[3]。大肠杆菌作为机体肠道内较为常见的细菌之一，成为各种耐药基因的储存库。因此，研究宠物源大肠杆菌的耐药性具有重要意义。本研究调查了2015年长春地区宠物源大肠杆菌的耐药流行情况，为宠物的临床用药提供了科学依据。
1 材料与方法
1.1 样品采集 2015年4月，从吉林省长春市两家宠物医院共采集135份肛拭子样品（其中犬122份、猫13份）。
1.2 主要仪器 生物安全柜（1300A2）购自美国Thermo公司；BD PhoenixTM-100 System细菌鉴定仪、PhoenixSpecTM 比浊仪均购自美国BD公司。
1.3 主要试剂与培养基 麦康凯琼脂为青岛高科园海博生物技术有限公司产品；胰蛋白胨、酵母提取物、牛肉浸粉、可溶性淀粉为英国Oxoid公司产品；大肠杆菌显色培养基为法国科玛嘉公司产品。
1.4 大肠杆菌分离纯化 向肛拭子样品管中加入1ml 0.85%的无菌生理盐水， 37℃恒温180rpm震荡10min，静置2min。无菌条件下，用接种环蘸取上清液于麦康凯琼脂培养基平板上划线，37℃过夜培养。每块平板上随机挑取一个紫红色、边缘光滑的单菌落于显色培养基上划线，37℃过夜培养。挑取紫红色单菌落接种于1ml LB液体培养基中，37℃恒温180rpm震荡培养过夜。
1.5 大肠杆菌PCR鉴定 根据文献[4]，用大肠杆菌16SrDNA特异性引物对大肠杆菌分离株进行PCR鉴定，引物序列见表1。